荧光定量PCR技术简介
我室自1996年开展了常规PCR技术,虽然具有很高的特异性和灵敏性,但仍有一些缺陷:①由于采用终点法检测,无法实现定量检测;②采用电泳法观察结果,极易造成污染;③不易进行质控;④结果判断有时会受非特异性扩增带的干扰等等,传统的实验方法已远远不能满足临床的需要。
近日我室引进国内最先进的荧光定量PCR检测系统,它是国际上最新研制的一种核酸定量技术,该技术在PCR反应系统中引入了荧光标记探针,具有高灵敏性、高特异性、和高精确性的特点。目前已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变和多态性研究等多个领域。
荧光定量PCR(简称FQ-PCR)由美国PE公司1995年研制成功,该技术是在常规 PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与普通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点:
1、 封闭反应,无需PCR后处理。
2、 特异性强,灵敏度高。
3、 采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确。
4、 定量范围宽,可达到10个数量级。
5、 仪器在线式实时检测,结果直观,避免人为判断。
6、 可实现一管双检或多检。
7、 操作安全,缩短时间,提高效率。
荧光定量PCR是一个方法,我们可根据临床科室的不同要求开展检测项目欢迎临床医生积极与我们联系,以有利于疾病的诊断和科研课题的研究。目前已开展的检测项目有:乙肝病毒DNA定量检测(静脉血2毫升、乳汁2毫升)
巨细胞病毒DNA定量检测(静脉血2毫升)
肺炎支原体DNA定量检测(静脉血2毫升)
生殖道淋球菌DNA定量检测(分泌物棉拭子+1毫升生理盐水)
生殖道沙眼衣原体DNA定量检测(分泌物棉拭子+1毫升生理盐水)
生殖道解脲支原体DNA定量检测(分泌物棉拭子+1毫升生理盐水)
人乳头瘤病毒DNA定量检测( HPV-6,-11,-16,-18)(分泌物棉拭子+1毫升生理盐水)
2005.04.01